了解移液不当的各种细微差别是确保准确性和精密度的最关键要素之一,特别是在人员流动率较高、实验室工作量不断增加和测试日益复杂的情况下。应记录完整的培训方案并包括定期的能力评估,即使这不是监管要求。整个实验室工作人员持续采用一致的移液技术可确保测试结果的一致性。
对于熟练的人来说,正确校准的移液器是一种准确且精密的仪器。然而,与任何精密仪器一样,技术不当会对测试结果产生负面影响。
1. 在液体处理步骤之前将移液器吸头 预湿 3 次
预润湿可增加吸头内的湿度,减少转移样品的蒸发。
2. 吸液时保持在半月板下方 2-6 毫米处
预润湿时,确保不要将移液器吸头浸入溶液中太深,以避免液滴粘在吸头的外表面。
3.在移液器、溶液和空气之间的温度平衡下工作
移液器容易受到分配样品温度变化的影响。冷液体往往会输送过量,而热液体可能会输送比预期更少的体积。除非另有说明,否则使用前请留出足够的时间让移液器和液体的温度达到平衡。
4. 在移液步骤之间使用移液器支架
尽量减少对移液器和吸头的操作,以避免体温传递到移液器。温度传递使移液器和吸头内的空气膨胀,从而导致吸入的样品体积发生变化。因此,建议在移液步骤之间使用移液器支架。
5. 分配样品前检查吸头
检查吸头外表面是否有液滴可以避免移液体积错误。如果发现水滴,请用无绒布仔细擦拭,避开尖端孔口。
6.了解标准和反向模式移液的使用
对水溶液使用标准模式移液,对粘性溶液使用反向模式移液,可避免因样品性质而产生的移液误差。
7. 抽吸后持续暂停
抽吸后,当吸头仍在溶液内时,持续暂停,以使吸头内的液体稳定。
8. 将移液器笔直拉出
抽吸后,确保避免吸头接触容器表面,并将其笔直拉出。在移取小体积样品时,表面张力是要避免的特别重要的因素,否则可能会导致样品体积不一致。
9.使用正确的移液器吸头
移液器和吸头之间的不匹配可能会导致移液器和吸头之间的密封不当,从而最大限度地减少样品损失。施加太大的压力可能会导致损坏吸头并改变样品体积。
10.使用一致的柱塞速度和压力
缓慢而稳定地按下和释放柱塞,以确保分配体积的一致性。缓慢而小心地操作柱塞可以避免由于移液时空气柱置换液体而产生的错误。
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