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常见问答
什么是细胞培养?
来源: 时间:2023-10-31

细胞培养是动物或植物细胞在人工受控环境中的生长。细胞要么直接从生物体中取出并在培养前分解,要么从先前建立的细胞系或细胞株中取出。

某些培养条件取决于细胞类型,但是,每种培养物都必须包含合适的容器和基质或培养基,为培养细胞提供营养物(例如氨基酸、碳水化合物、维生素、矿物质)、生长因子或必需激素。气体(O2、CO2)、理化环境(pH、渗透压、温度)在人工环境中调节细胞的正常生长也发挥着重要作用。

细胞培养应用

是分子和细胞生物学中主要的一致且可重复的工具。

有助于研究正常细胞稳态、细胞生物化学、新陈代谢、突变、疾病和复合效应。

是疾病和药物筛选的模型系统。

基本细胞培养设备

细胞培养实验室的具体设备取决于所进行的研究类型,但是所有细胞培养实验室都有相同的共同目标:没有病原微生物。

下面的扩展列表对应了大多数细胞培养实验室的设备和用品,使工作更加高效和准确。

细胞培养 - 70%乙醇防腐剂 - 细胞培养箱
- 吸气泵 - 离心机
- 高压灭菌器 - 冰箱冰柜
- 细胞计数器 - 手套
- 细胞培养瓶 - 培养基、血清、细胞培养基添加剂
- 细胞培养级培养皿 - 各种容量的移液器
- 各种尺寸的细胞培养级管 - 血清移液管
- 细胞培养罩 - 无菌过滤器
- 细胞培养微孔板 - 废物容器

*请注意:具体的细胞培养设备取决于细胞类型和研究目的

细胞培养安全

在细胞培养实验室工作与不同的风险因素和危害有关,例如毒素或诱变试剂。人类/动物材料可能含有病毒和其他危险的生物制剂。因此,在操作人类/动物材料时,遵循实验室实践的一般安全指南非常重要。

1. 进入和离开实验室前要洗手。

2. 穿戴安全服(手套、封闭鞋、实验服)。

3、不饮食、不吸烟。

4. 不产生气溶胶或产生很少的气溶胶。

5. 实验前后对所有表面进行净化。

6. 按照设施指南工作。

7. 以适当的方式处置所有废物。

8. 仅限授权人员进入。

9.避免使用锋利的物体。

10. 始终为所有样品贴上清晰的标签。

11. 向安全官员报告所有事件。

细胞培养时所需的无菌技术

为了在细胞培养中取得成功,必须保持无污染的环境(细菌、真菌等)。无菌技术可确保没有微生物进入细胞培养物。通过一系列程序确保细胞培养无菌。

细胞培养时需要无菌技术

处理 试剂/介质 职场
缓慢/小心处理。 所有试剂/设备的预灭菌 细胞培养罩工作正常
开始前对所有物品进行消毒。 试剂无污染(有效期、外观正常)。 经常净化(抽油烟机、冰箱等)
无菌移液器   工作区域:无菌、整洁
禁止将无菌物品接触未灭菌的表面    



细胞培养环境

细胞培养是一种神奇的工具,可以轻松控制和操作所有理化和生理细胞因素,例如温度、渗透压、pH、气体、激素和营养物质。

细胞培养环境。

媒体 酸碱度 温度 二氧化碳
含有营养素、生长因子和激素 哺乳动物细胞的平均 pH 值为 7.4 取决于宿主的体温 受媒体控制
生长血清源、tipids、激素   哺乳动物细胞系 36-37°C 有机或 CO2 碳酸氢盐缓冲系统很受欢迎
    插入细胞系 27-30°C 会影响 pH 值
      4-10% C02 最常见


细胞培养的培养基补充剂

培养基补充剂有助于根据所选组织或细胞类型优化特定应用的细胞生长。使用生长因子或细胞因子等培养基补充剂的优点是它们可以改善细胞活力和生长,并使细胞更长时间地保持健康。例如,成纤维细胞生长因子 (FGF) 在体内和体外的多种生物学功能中发挥着重要作用,并且可以在周末维持细胞培养,因为 Proteintech 耐热 FGF (HZ-1285) 不需要每天更换培养基。

细胞培养 FGFbasic-TS 和 FGF basic(源自大肠杆菌)在 37°C 下无异源、化学成分确定的细胞培养基中的稳定性。连续 3 天每天通过 ELISA 测定蛋白质浓度。37°C 孵育一天后,检测不到 FGF basic,而第 1、2 和 3 天时 FGFbasic-TS 的浓度分别为起始浓度的 60%、35% 和 20%。

生长因子对于维持体外培养物的生长起着至关重要的作用。 根据环境的不同,某些细胞可以产生多种谱系特异性的细胞类型。

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