染菌分为培养基自身染菌和拆包装操作不当引起二次染菌,因此实验室人员在使用培养皿前需要做仔细区别,检验确认后再使用。
原因分析:
1. 培养基自身带菌(以霉菌为主且菌落通常在培养基内部或表面)。
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厂家生产控制不严,灭菌前微生物负载量过大;
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伽马射线灭菌剂量偏低(霉菌的耐受性较强);
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包装破损出现的二次污染。
2. 使用不当出现的染菌问题(细菌霉菌几率均等,多在培养基表面或琼脂和平皿的测边缘)。
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小包装使用剩余的暂存(冰箱或A级区域);
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拆包装在普通区传递窗一次性拆除三层包装的特殊案例;
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拆包装时动作幅度过大,平皿散落;
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b/c两项中会出现特殊染菌现象,菌在平皿边缘生长,或延平皿与培养基缝隙生长的特例。(这个通常和包装真空,气流倒吸相关)
处理措施:
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拆包装前认真观察,染菌平皿很容易在使用前被发现;
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过新批次,和低温存放是霉菌假阴性结果的潜在风险加大;
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对操作人员进行必要的培训,增强无菌操作意识。