凡是混入细胞培养环境中对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染，细胞污染不能完全被消除，但能减少其发生的频率和后果的严重性。

常见污染类型

1. 细菌污染

特征：大小在0.5~5 μm，比动物细胞小很多。多呈球状或杆状，形态规则，分布均匀；增殖速度快，一般污染后48~72小时爆发式增殖；营养消耗快，培养基很快变黄，变浑浊；镜下观察有明显的定向运动。

处理方法：轻度污染可用10X双抗清洗处理，重度污染建议消杀后丢弃。

2. 真菌污染

特征：呈链球状或丝状。常形成肉眼可见的菌落，培养基颜色无变化或变紫，仅对局部细胞影响较大，其他地方生长正常。会形成孢子，容易污染其他细胞。

处理方法：真菌污染较难根除，不建议保留，建议消杀后丢弃。

3. 支原体污染

特征：最小的微生物，无法通过光学显微镜看见，但可通过电镜观察到。感染支原体的细胞，在某一时间点碎片突然增多，随着传代，细胞状态显著变差。支原体污染可通过气溶胶传播，影响同一细胞房其他细胞。

鉴定方法：PCR法、显色法、荧光染色法等。

处理方法：若细胞状态尚可，添加支原体抑制剂培养2-3代可转阴；若细胞状态很差，建议消杀后丢弃。

4. 黑胶虫污染

特征：无明确定义，镜下无法直接观察到。主要表现为细胞状态差，黑点和碎片多，布朗运动。通过检测发现主要为支原体污染，部分为未知的增殖不明显的微生物污染。

处理方式：若细胞状态尚可，添加黑胶虫/支原体抑制剂培养2-3代可转阴；若细胞状态很差，建议消杀后丢弃。

5. 细胞交叉污染

特征：即不同的细胞混杂在一起

鉴定方法：同种属：STR鉴定，多等位基因数大于3个。

不同种属：PCR法，对种属特异性基因进行扩增，不同种属产物大小不同。

处理方法：建议重新引种。

以上是常见的细胞污染的类型及处理方法，希望大家牢记并能对后续实验有所帮助。

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